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基于代谢组学分析的海带多糖在秀丽隐杆线虫中的抗氧化和抗衰老活性思维导图模板大纲
每个 NGM 平板至少含有 50 条蠕虫,平板大小未提及
热水提取和DEAE纯化制备LJP
图 1.LJP 的结构鉴定。(A) LJP 的光谱,(B) LJP 的分子量,(C 和 D) 单糖的气相色谱 法(C:标准品;D:LJP)。峰依次代表 Fuc、Gal、Glc、Xyl、Man、GulA、GlcA 和 ManA。
傅里叶变换红外光谱,鉴定其化学结构
自由基清除活性测试
图 2.LJP 的抗氧化活性。(A) DPPH 测定;(B) ABTS 测定;(C) 羟基自由基测定。结果以平均值±标准差 (n = 3) 表示。
图 3.秀丽隐杆线虫的存活曲线 (N2) 热应激 (35 °C) 后用 LJP (0、0.25、0.5 和 1 mg/mL) 处理 (A 和 B) 和 H2O2刺激 (25 °C) (C 和 D)。⁎P < 0.05, ⁎⁎与 NG 组相比,P < 0.01。LJP 对秀丽隐杆线虫 T-SOD、MDA 和 ROS 水平的影响。(E、F 和 G)。使用荧光显微镜观察 NG (H-I) 、LJP-L (J-K)、LJP-M (L-M) 和 LJP-H (N-O) 组的脂褐素水平。发现 NG、LJP-L、LJP-M 和 LJP-H 组线虫细胞的相对荧光强度为 ⁎⁎与 NG 组相比,P < 0.01,与 LJP-L 组相比 P < 0.01 (P)。LJP 对秀丽隐杆线虫 Glp-1 和 Age-1 (Q) 、Daf-2 和 Daf-16 (R) 、Skn-1 和 Sod-3 (S) 表达的影响。##⁎P < 0.05,⁎⁎与 NG 组相比,P < 0.01
热应激
中位寿命
存活曲线
过氧化氢刺激
中位寿命
存活曲线
T-SOD活性
MDA水平
ROS水平
实时荧光定量PCR
(H-P) 脂褐素水平
Daf-2和Daf-16的表达
Glp-1和Age-1的表达
Skn-1和Sod-3的表达
探讨分子机制
图 4.NG 和 LJP 之间代谢物的多变量分析。(A) PCA 的评分图,(B) OPLS-DA 的评分图,(C) OPLS-DA 模型验证。(D) NG 与 LJP 组的火山图。每个点代表一种代谢物:红色 = 上调的代谢物;绿色 = 代谢物下调;灰色 = 差异不显著的代谢物。(E) 点大小表示 VIP 的值。与 NG 组相比,LJP 组有 20 种代谢物发生显著变化。(F) 代谢途径拓扑分析的结果。统计显著性值 (P < 0.05) 由从红色到紫色的色标直观地表示,其中红色表示差异最大,紫色表示差异最小。点大小表示纵轴上代谢途径中的代谢物计数。(G) LJP 干预改变的代谢途径的整合。在此路径图中,红色表示上调,绿色表示下调。(H) 代谢物、抗氧化和抗衰老因子之间的相关性。⁎P < 0.05,⁎⁎P < 0.01。
气相色谱-质谱(GC-MS)分析秀丽线虫的代谢物
主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对代谢数据进行多变量分析
分析差异代谢物,并探讨LJP对秀丽线虫代谢通路的影响
以揭示潜在作用机制