临床常见病原体检测基本介绍
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临床常见病原体检测思维导图模板大纲
一、耐药产生的主要机制
1.细菌水平和垂直传播耐药基因的整合子系统
2.产生灭活抗生素的水解酶和钝化酶
3.细菌抗生素作用靶位的改变
4.细菌膜外排泵出系统
5.细菌生物膜的形成
检查项目、结果和临床应用
(一)药物敏感试验K-B纸片琼脂扩散法、稀释法、浓度梯度纸条扩散法(E试验)、耐药筛选试验纸片扩散法(S,1,R)、耐药筛选实验(单一药物、单一浓度检测耐药性)
(二)耐药菌监测试验1.耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)2.高浓度氨基苷类耐药肠球菌 3.耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)4.β-内酰胺酶 5.超广谱β-内酰胺酶(ESBL)
(三)病原体耐药基因的检测1.获得外源性基因2.细菌自身基因的突变
1.血液:对于疑为菌血症、败血症、脓毒血症的患者要在发热初期、发热前2小时或发热高峰期采集,对于已用过抗菌药物治疗者则在下次用药前采集。
2.尿液:外尿道寄居有正常菌群,需注意无菌操作,同时尿液中不能加入防腐剂。
3.粪便:对于传染性腹泻患者需三次送检粪便进行细菌培养。
4.呼吸道标本:鼻咽拭子、痰、通过气管收集的标本均可作为呼吸道标本;上呼吸道标本存在正常菌群,做病原体诊断时需注意。
5.脑脊液:引起脑膜炎的病原体肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等抵抗力弱,采集时需床边接种或保温送检。
6.胸水、腹水、心包液:这类标本含菌量少,需要采集较大量。
7.创伤标本:采集部位需要做清污处理,避免皮肤表面污染菌混入标本影响结果。
临床病原体检查方法 其主要手段包括:
直接显微镜检查:重要的基本方法,常作为初步诊断但阳性率相对较低。
特异性抗原检查:可作为早期快速诊断,但特异性是关键。如免疫荧光技术、酶免疫技术、化学发光技术、胶乳凝集技术等。
病原菌分离培养和鉴定:常为确诊的关键步骤,但常较费时。
核酸检查:近年来发展迅速,敏感性和特异性均较好。如PCR、分子杂交、DNA测序等。
血清学检查:通过检测相应的特异性抗体以辅助诊断。如肥达氏试验、军团菌抗体检查等。应进行双份血清检测,两次抗体效价相差4倍以上有意义。
细菌毒素检测:内毒素和外毒素。
流行病学特点:疾病谱发生变迁、多重耐药菌不断出现、病人免疫防御功能降低
检查项目:细菌感染、病毒感染、真菌感染、寄生虫病、其他病原体感染(支螺立衣)
支原体检测:DNA探针技术、荧光定量PCR,用于快速检测
立克次体检测:非特异性血清实验、特异性血清实验
衣原体检测:DNA探针技术、荧光定量PCR
螺旋体检测:显微镜凝集试验、间接凝集试验、酶联吸附试验检测病人血清中特异性抗体
甲型肝炎病毒检测
1)抗-HAV IgM出现较早,为甲型肝炎早期诊断最常用而简便的可靠指标。
2)抗-HAV IGg出现较晚,IGg在急性肝炎后期和恢复早期出现(IgM开始下降时),可在体内长期存在。
3)其他检测潜伏末期及急性初期患者粪便标本中的HAV RNA、HAAg、HAV颗粒等,阳性可确诊为HAV感染。一般不用于临床,主要用于研究。
乙型肝炎病毒检测
乙肝五项:
1) HBsAg是感染HBV后最早出现的血清学标志。血2)抗-HBs是感染HBV后机体产生的唯一保护性抗体,对HBV具有中和作用。见于乙肝恢复期、HBV既往感染者和乙肝疫苗接种后。
2)HBeAg是病毒复制活跃、传染性强的标志。急性乙型肝炎患者若HBeAg持续阳性10周以上,可能转为慢性感染。
3)抗-HBe的出现预示着病毒复制减少或终止,传染性减弱。
4)抗-HBc:此为HBcAg刺激机体产生的,抗-HBc为感染HBV后最早出现的抗体,属非中和性抗体,可持续存在多年。故抗-HBc是HBV感染的标志,可能为现症感染或既往感染。
5)HBcAg,血液中一般无游离的HBcAg.血清HBcAg阳性表示血液内含有HBV,患者传染性强,HBV复制活跃。
具备下列任何一项即可确定为HBV现症感染:
①血清HBsAg阳性;
②血清HBV DNA阳性;
③血清抗-HBc IgM阳性;
④肝内HBcAg和(或)HBsAg阳性或HBV DNA阳性。
流行病学性传播性疾病(sexually transmitted disease,STD),英文缩写STD,是指通过各种性接触而传播的侵犯皮肤、性器官及全身多脏器的疾病,简称性病。
分类:经典(传统)STD:梅毒、淋病、软下疳和性病性淋巴肉芽肿。
传播途径包括
1. 性行为传播
2. 间接接触感染:通过污染的衣物、器具等。
3. 血液与血制品传播:主要是梅毒和获得性免 疫缺陷症可以通过此途径传播。
4. 对胎儿和新生儿的传播: 包括宫内传染、分娩过程中的感染和产后传染。
5. 职业性传播:主要指医务人员在接触或治疗性 传播疾病患者时不慎被感染。
检查项目
HIV测定直接显微镜检查与分离培养:病毒培养是检测HIV感染最精确的方法
梅毒病原体检测:直接显微镜检查(有初步诊断价值)
淋病病原体检测:PCR假阳性率高
非淋球菌性尿道炎病原体检测:①姬姆萨染色或碘染色见包涵体;②分离培养(有确诊意义);③PCR方法等。
生殖器疱疹和尖锐湿疣病原体检测
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