克隆胚产制过程思维导图

动物克隆胚产制过程，主要包括受核卵母细胞的去核操作、细胞注入卵的显微操作、受核卵母细胞与注入细胞的细胞融合以及融合细胞的激活处理等四项技术。

克隆动物所使用的细胞核来源，主要有已分化的细胞和未分化的胚叶细胞或胚干细胞。已分化细胞经增生后仍维持其原有的细胞特性，如皮肤细胞只能增生为皮肤细胞，肝脏细胞也仅能增生成肝脏细胞；换言之，已分化细胞的后续发育命运，无法回溯到如早期胚般具有发育成完整个体的全能性。未分化的胚叶细胞或胚干细胞，虽具有发育成个体中各类细胞的能力，惟截至目前为止，仅见四细胞期以前的早期胚的单一胚叶细胞，有发育成完整个体的纪录，而八细胞期以上的仍无成功的案例；显见此等单一未分化细胞，发育成个体的潜能仍局限于甚早的胚期，但若将这些未分化或已分化的单一细胞，注入卵母细胞，则可改变其命运使之有能力发育成一完整生命体。

哺乳动物的克隆并非仅靠一个细胞即可达成，医学教.育网搜集整理此一细胞必须借助卵母细胞内所含发轫因子，将基因组再程序化作用后，始具有发育能力。然因卵母细胞内原已拥有双套的染色体，若不加以去除，它与注入含两套染色体的体细胞融合后，将形成四套染色体的异常现象。因此，首要步骤是先将卵母细胞内的双套染色体去除，其后，再利用显微操作技术，将含有正常两套染色体的单一细胞注入卵内。

当精子穿入卵透明带与卵细胞膜接触后，即产生自发性的融合现象，以促使精子细胞核进入卵内，而完成受精作用，这是自然的精卵受精过程。然而，克隆胚产制过程中，供核细胞在注入卵膜间隙后，供－受核细胞间无法自发性发生如精卵接触后的融合现象，而必须藉由外力迫使其融合。利用电刺激可促使细胞融合，乃因细胞经电激处理后，细胞膜表面会形成约0.5奈米的小孔，经证实，此小孔即为导引两细胞发生融合的媒介。

大多数哺乳动物的卵母细胞在排卵时，其细胞周期乃静休于第二次减数分裂中期。正常授精情况下，精子表面与卵母细胞贴附时，在接触位置引发卵母细胞内钙离子浓度的增加，并在3～6秒的时间内，迅速扩及整个细胞，引导卵母细胞产生皮质颗粒胞泌作用，防止多精入卵。随后，细胞内钙离子浓度呈现周期性增加，并持续数小时，进而激活卵母细胞，使其恢复第二次减数分裂。

体细胞克隆时，虽供核细胞已融入卵母细胞内，但供核细胞融入后，并无法激发如精卵融合后所产生的激活机制，因而需要以人为激活方式，模仿精子激活卵母细胞。利用电刺激或酒精，增加卵母细胞内钙离子的浓度，或直接以化学试剂抑制细胞静止因子的活性，均可激活卵母细胞。