一、标本的采集 (一)患者标本的采集。 急性期血清:发病1周内,无菌静脉采集非抗凝血5ml. 恢复期血清:发病后2至 3周或以上,无菌静脉采集非抗凝血5ml. (二)伊蚊标本的采集。 在本病暴发或流行期间,采集疫点的伊蚊成蚊和幼虫,用于病原学检测。
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基孔肯雅热实验室检测方案思维导图模板大纲
(一)患者标本的采集。
急性期血清:发病1周内,无菌静脉采集非抗凝血5ml.
恢复期血清:发病后2至 3周或以上,无菌静脉采集非抗凝血5ml.
(二)伊蚊标本的采集。
在本病暴发或流行期间,采集疫点的伊蚊成蚊和幼虫,用于病原学检测。
血液标本采集后,在4℃条件下尽快运送至实验室进行血清分离并保存。
血清标本可置于-20℃冰箱短期保存,长期保存须置-70℃以下。
标本运输按照卫生部《人间传染的病原微生物名录》的规定执行。
常用检测方法主要有3种:血清学检测、核酸检测和病毒分离。一般情况下,病毒分离与核酸检测宜采用发病后1周内的血清; IgM抗体检测宜采用发病4天后的血清,IgG抗体的检测宜采用发病1周后的血清。
(一)血清学检测方法。
1.特异性IgM检测。
采用的方法有:捕获ELISA法(MacELISA)、间接ELISA法、免疫荧光法和免疫层析法等。
2.特异性IgG检测。
采用的方法有:间接ELISA法、免疫荧光法和免疫层析法等。
3.意义
(1)IgM阳性结果,表明患者新近CHIKV感染,用于基孔肯雅热早期诊断。
(2)IgG阳性结果,表明曾受到CHIKV感染;恢复期血清抗体滴度比急性期抗体滴度有4倍或4倍以上升高则可确诊。
(二)病原学检测方法。
1.基孔肯雅病毒核酸检测。
一般发病后7日内在多数患者的血清中可检测到病毒核酸。冻存伊蚊标本也可进行基孔肯雅病毒核酸检测医学教育`网整理。可采用RT-PCR和Real-time RT-PCR等核酸扩增的方法检测。
2. 病毒分离鉴定。
常用Vero、C6/36等敏感细胞系开展病毒分离,分离物可以免疫荧光法或核酸检测进行鉴定。
3.意义。
患者血清中分离到基孔肯雅热病毒和/或检测到病毒核酸后,可确诊基孔肯雅热病毒感染。
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