1.培养液准备:取15ml培养瓶数个,每瓶内分别充入5ml培养液(pH7.2),内含:1640培养液(含10%~15%小牛血清),PHA0.1ml,青霉素100单位和链霉素100微克/毫升培养液 2.抽血针管准备:取2~5ml针管一支,在消毒后的无菌操作台或无菌操作箱中安装好注射器,无菌抽肝素(100U/mlBBS)少许湿润针管,如动作迅速不用肝
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人末梢血微量全血培养染色体显示法思维导图模板大纲
1.培养液准备:取15ml培养瓶数个,每瓶内分别充入5ml培养液(pH7.2),内含:1640培养液(含10%~15%小牛血清),PHA0.1ml,青霉素100单位和链霉素100微克/毫升培养液
2.抽血针管准备:取2~5ml针管一支,在消毒后的无菌操作台或无菌操作箱中安装好注射器,无菌抽肝素(100U/mlBBS)少许湿润针管,如动作迅速不用肝素亦可。
3.采血:用棉签75%酒精给患者或献血者的皮肤消毒两次,缚止血带,静脉取血1~2ml.无菌操作迅速向每一瓶培养中加血0.4~0.5ml,如系外出采血,安装针管及分装血液两步骤亦可在无菌条件略差的环境内操作,但动作要迅速,以减少污染;在采血量不多或不应抽血的情况下,亦可在耳垂、手指肚(无名指)用刺血针采血。
4.培养和加秋水仙素:37℃温箱中培养到60~72小时之间,此时细胞分裂相最多,向每培养瓶内加秋水仙素,最终浓度0.02~0.08微克/毫升营养液,再培养4~6小时。
5.低渗:1000转/分钟离心10分钟,吸除上清液,加入预温过的0.075MKCl溶液10ml,医学教.育网搜集整理置温箱中低渗处理15~20分钟。
6.其余步骤与处理传代细胞法相同。
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