本章节讲述了基因工程的知识点,主要内容包括基因工程的概念和基因操作的工具以及基因操作的基本步骤等
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基因工程简介 思维导图模板大纲
标准概念
在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组细胞在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物
通俗概念
按照人们的意愿,把一种生物的个别基因复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状
基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶)
分布
主要在微生物中
作用特点
特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点
结果
产生黏性未端(碱基互补配对)
基因的针线——DNA连接酶
连接的部位
磷酸二酯键,不是氢键
结果
两个相同的黏性未端的连接
基困的运输工具——运载体
作用
将外源基因送入受体细胞
具备的条件
能在宿主细胞内复制并稳定地保存
具有多个限制酶切点
有某些标记基因
种类:质粒、噬菌体和动植物病毒
质粒的特点:质粒是基因工程中最常用的运载体
提取目的基因
目的基因概念
人们所需要的特定基因,如人的胰岛素基因、抗虫基因、抗病基因、干扰素基因等
目的基因与运载体结合
用同一种限制酶分别切割目的基因和质粒DNA(运载体),使其产生相同的黏性末端,将切割下的目的基因与切割后的质粒混合,并加入适量的DNA连接酶,使之形成重组DNA分子(重组质粒)
将目的基因导入受体细胞
常用的受体细胞:大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞
目的基因检测与表达
检测方法如:质粒中有抗菌素抗性基因的大肠杆菌细胞放入到相应的抗菌素中,如果正常生长,说明细胞中含有重组质粒。
表达:受体细胞表现出特定性状,说明目的基因完成了表达过程。如:抗虫棉基因导入棉细胞后,棉铃虫食用棉的叶片时被杀死;胰岛素基因导入大肠杆菌后能合成出胰岛素等。
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