简单介绍PCR技术的内容
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PCR技术思维导图模板大纲
体外目的DNA扩增
基本成分
模板DNA
特异DNA引物(扩增特异DNA序列)
耐热性DNA聚合酶
dNTP及含有Mg2+的缓冲液
基本步骤
①变性:加热至94℃,DNA变性为单链
②退火:下降至适宜温度(一般较Tm低5℃),引物与模板DNA结合
③延伸:升至72℃,DNA聚合酶以dNTP为底物合成DNA
主要用途
目的基因的克隆
基因的体外突变
DNA和RNA微量分析
DNA序列测定
基因突变分析
逆转录PCR
用逆转录的方法获取目的基因和对RNA进行分析
原位PCR技术
在单个组织或细胞中进行PCR,定位效果好
实时/定量PCR技术
动态监测产物量, 实现准确的定量分析
荧光技术标记