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分析化学毛细管电泳法思维导图

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溪若 浏览量:122022-11-16 04:21:28
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分析化学毛细管电泳法思维导图

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思维导图大纲

分析化学毛细管电泳法思维导图模板大纲

基本概念

电泳 电介质中带电粒子在电场作用下以不同速度向电荷相反方向迁移的现象

电泳法 利用电泳现象对物质进行分离分析的方法,称之为电泳法

电渗和电渗率 电渗是一种液体相对于带电的管壁移动的现象

单位电场强度下的电渗速度称为电渗率

Zeta电势在电场作用下,固液两相的相对运动发生在紧密层与扩散层之间的滑动面上,此处的电动电势即为Zeta电势

淌度 溶质在给定缓冲液中单位时间和单位电场强度下移动的距离,也就是单位电场强度时的电泳速度

有效淌度 考虑离子活度系数、溶质分子的离解程度等影响的淌度

表观淌度 在电泳过程中,溶质除在电场作用下产生电泳以外,还受到电渗流的影响,两者的矢量和称为表观淌度

毛细管电泳柱

毛细管电泳柱中溶液为扁平型电渗流流型

高效液相色谱柱中为抛物面动力学流型,这是导致毛细管电泳高效的重要原因

谱带展宽:在毛细管电泳中,影响谱带展宽的原因主要是分子扩散、自热、吸附

这些影响因素对毛细管电泳的左右错次,另仪器死体积也会使谱带变宽

分离操作条件

毛细管电泳主要分离模式包括:毛细管区带电泳,胶束电动毛细管色谱

毛细管凝胶电泳,毛细管等速电泳,毛细管等电聚焦和毛细管电色谱

在药物分析中常用毛细管区带电泳,胶束电动毛细管色谱,毛细管凝胶电泳和毛细管电色谱

根据样品的性质选择不同的操作模式,每种模式下影响因素不尽相同

通过调节影响因素达到分离的目的,应重点掌握毛细管区带电泳操作条件的选择

在毛细管区带电泳中,分离电压、缓冲溶液种类和浓度及pH、添加剂等是主要的操作条件

电泳和电泳淌度

电渗和电渗淌度,表观淌度,分离效率和谱带展宽及主要影响因素,分离度

毛细管电泳的几种主要操作模式:毛细管区带电泳,胶束电动毛细管色谱,毛细管凝胶电泳

毛细管电色谱,非水毛细管电泳,毛细管电泳仪器的主要部件

比移值及其与保留因子的关系、相对比移值、分离度和分离数

薄层色谱法及其主要类型;吸附薄层色谱中吸附剂和展开剂及其选择

薄层色谱操作步骤,定性和定量分析;高效薄层色谱法;薄层扫描法;纸色谱法。

毛细管电泳分析的基本术语

电泳和电泳淌度,电渗和电渗淌度,表观淌度;毛细管电泳中几种基本的分离模式

毛细管区带电泳、胶束电动毛细管色谱、毛细管电色谱

熟悉评价分离效果的参数及影响分离的主要因素,操作条件的选择

了解毛细管电泳仪器的主要组成薄层色谱和纸色谱的原理

常用的固定相和流动相(展开剂);比移值与分配系数、保留因子的关系

吸附薄层色谱中吸附剂和展开剂的选择;薄层色谱中薄层板的种类,显色方法

熟悉平面色谱法分类,面效参数与分离参数,薄层色谱和纸色谱的操作方法,定性定量分析方法

毛细管电泳的分离模式

毛细管区带电泳

最常见的模式,用以分析带电溶质。样品中各个组分因为迁移率不同而分成不同的区带

为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁做化学修饰

毛细管凝胶电泳,在毛细管中装入单体,引发聚合形成凝胶

主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物

另有将聚合物溶液等具有筛分作用的物质,如葡聚糖、聚环氧乙烷,装入毛细管中进行分析

称毛细管无胶筛分电泳,故有时将此种模式总称为毛细管筛分电泳,下分为凝胶和无胶筛分两类

胶束电动毛细管色谱

胶束电动毛细管色谱,在缓冲液中加入离子型表面活性剂

被分离物质在水相和胶束相(准固定相)之间发生分配并随电渗流

本模式能用于中性物质的分离

亲和毛细管电泳

在毛细管内壁涂布或在凝胶中加入亲和配基

毛细管电色谱

毛细管电色谱,是将HPLC的固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂布固定相

以电渗流为流动相驱动力的色谱过程,此模式兼具电泳和液相色谱的分离机制

毛细管等电聚焦电泳

毛细管等电聚焦电泳,是通过内壁涂层使电渗流减到最小,再将样品和两性电解质混合进样品

两个电极槽中分别为酸和碱,加高电压后,在毛细管内建立了pH梯度

溶质在毛细管中迁移至各自的等电点,形成明显区带

聚焦后用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH值使溶质通过检测器

毛细管等速电泳

毛细管等速电泳,采用先导电解质和后继电解质,使溶质按其电泳倘度不同得以分离。

以上各模式以CZE、CGE、MECE三种应用较多。

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