动物细胞工程思维导图

Ⅰ定义：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 Ⅱ原理：细胞增殖（有丝分裂）。 Ⅲ培养对象：胚胎或幼龄动物的细胞。 Ⅳ目的：获得细胞或细胞产物。

培养条件：①营养条件：糖类（通常选择葡萄糖）、氨基酸、无机盐、维生素...通常需加入动物血清等天然成分。一般为液体培养基，也称为培养液。②无菌、无毒的环境。可加入适量抗生素来防止杂菌污染。定期更换培养液，以便清楚代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。③温度（多以36.5±0.5°C为宜）、pH（多为7.2~7.4），渗透压。④气体环境：95%空气和5%CO₂（O₂是细胞代谢所必需的，CO₂主要作用是维持培养液的pH）。

过程：取动物组织（一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官）→用机械的方法或用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，将组织分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养（两种状态：悬浮生长和贴壁生长，其中贴壁生长的细胞会出现接触抑制的现象，因此需要分瓶）→分瓶（悬浮生长的细胞直接离心法收集，贴壁生长的细胞需重新用胰蛋白酶处理，使之分散为单个细胞后再用离心法收集），进行传代培养。（整个培养过程在CO₂培养箱中进行）传代50次以后，细胞遗传物质可能会发生变化，出现异倍体核型，可连续传代（癌细胞）。

干细胞的培养及应用

Ⅰ定义：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 Ⅱ原理：细胞膜的流动性。 Ⅲ结果：获得杂交细胞。 Ⅳ融合方法：物理法、化学法（与植物原生质体融合相同），多了一种灭活病毒诱导法（动物细胞融合所特有）。 Ⅴ融合完成的标志：细胞核融合 形成杂交细胞。 Ⅵ意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。

单克隆抗体Ⅰ优点：特异性强，灵敏度高，可大量制备 Ⅱ单克隆抗体（导向作用）+抗癌药物（杀伤作用） =“生物导弹” Ⅲ制备过程及原理：

Ⅰ定义：将动物一个细胞的细胞核移入去核卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，进而发育成动物个体的技术。得到的动物称为克隆动物。动物的一个细胞的细胞核为供体，去核的卵母细胞为受体。 Ⅱ原理：动物细胞核的全能性。 Ⅲ繁殖方式：无性生殖。 Ⅳ分类：胚胎细胞核移植（难度小）和体细胞核移植（难度大） 。

过程：