牙龈卟啉菌内毒素化学组成和SDS-PAGE图谱分析思维导图

1.LPS的制备：应用酚水法、核酸酶消化和超离心法提取Pg47A-1株、E.coliO55B544336株和钩端螺旋体Leo株的LPS(LeptospiralLPS,L-LPS)。

2.脂肪酸和单糖的分析：LPS经酸水解后释放的脂肪酸和单糖分别与硫酸-甲醇、乙酸酐反应，生成甲基酯和乙酸醛醇衍生物，用OV-17和SilarFCP柱分别进行脂肪酸和单糖的气相色谱分析。

3.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)：采用垂直不连续板状电泳系统和银染色法分析各种LPS的SDS-PAGE图谱［3］。

1.脂肪酸分析结果：Pg-LPS主要含羟基十五烷酸、羟基十七烷酸和羟基棕榈酸，E-LPS主要含羟基豆蔻酸、豆蔻酸和月桂酸(表1)。LPS的毒性主要取决于其所含脂肪酸的种类。Mcintire等曾证明，若从E-LPS中去除月桂酸(12∶0)、豆蔻酸(14∶0)和羟基豆蔻酸(3-OH-14∶0)或代以奇数碳原子脂肪酸，则LPS的内毒素活性明显下降。故认为脂肪酸组成的差异是导致Pg-LPS毒性较低的主要原因之一。

2.单糖分析结果：Pg-LPS和E-LPS的单糖组成和含量相似，但E-LPS缺乏木糖(表2)。已有研究表明，LPS的Ⅰ型类脂A骨架为氨基葡萄双糖，Pg-LPS和E-LPS均有较高含量的氨基葡萄糖，故可以认为两者均为Ⅰ型类脂A的LPS。

3.SDS-PAGE图谱：已有报道树图思维导图搜集整理。