中国茶预防龋病的实验研究思维导图

1.茶浸液制备：将各组0.5g茶叶浸入50ml煮沸的双蒸水中，匀速搅拌5分钟后再放置5分钟过滤取茶浸液。

2.氟和鞣酸浓度的测定：用TISAB缓冲液及氟离子电极测定了30种茶氟的含量。本研究选用龙井茶、乌龙茶和四川涪陵红茶，测定了氟含量。采用Holf等的固定蛋白的方法测定鞣酸浓度。

3.动物模型：36只出生后15～17天的Spaguo-Dawby种大鼠，喂以饲料2000(日本配合饲料株式会社)，加入四环素4mg/g和饮用水(每毫升加青霉素400U)。同时，每日以青霉素G0.1ml(含400U)置入口腔，抑制鼠口腔中固有菌群的生长。在大鼠生长到18～22天时，将具有链霉素抗性的StreptococcusSobrinus6715菌株(血清型g)悬浮于10ml消毒盐水制备1010CFU/ml的悬浮液，连续5日，将含有100μl变链菌株6715的悬浮液接种在每只大鼠的磨牙牙龈部。

4.实验分组：大鼠出生后的第18天，将36只鼠随机分为四组，每组9只，A组为对照组，B组(龙井茶)、C组(乌龙茶)、D组(涪陵江茶)为实验组。喂以致龋食物2000。该饲料主要成分是蔗糖，同时给与实验茶和对照双蒸水医学教育 网搜集整理。

5.细菌计数：在接种StreptococcusSobrinus6715第14、28、49天用消毒棉拭子在鼠磨牙的颊面和牙合面按统一的方法擦拭菌斑。将棉拭子放在1ml消毒盐水试管中摇匀后，取悬浮液涂布于含链霉素(500mg/ml)的M-S培养平板，37℃培养72小时，计算平板的检出菌落数。

6.菌斑及龋蚀程度检测：出生77天后的大鼠被处死，取其颌骨。上颌牙用1.5%的藻红染色，按Rogolati和Hotz方法计算牙菌斑指数。将下颌骨软组织和沟裂部的食物残渣去净后，再经超声波清洗处理，用1.5%藻红染色4小时，制作牙齿磨片。显微镜下检测第1、2、3磨牙颊-舌面，牙合面和近中面龋蚀状况。龋蚀程度按Keyes计算方法记录。