方法名称:六味地黄丸-没食子酸测定-高效毛细管电泳法 应用范围:该方法采用高效毛细管电泳法测定六味地黄丸中没食子酸的含量。 该方法适用于中成药六味地黄丸。
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六味地黄丸-实验室测定方法思维导图模板大纲
方法名称:六味地黄丸-没食子酸测定-高效毛细管电泳法
应用范围:该方法采用高效毛细管电泳法测定六味地黄丸中没食子酸的含量。
该方法适用于中成药六味地黄丸。
方法原理:供试品粉碎后,加95%乙醇浸泡,加热回流提取,过滤,用高效毛细管电泳仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长271nm处检测没食子酸的吸收值,计算其含量。
试剂:1. 硼砂
2. 95%乙醇
3. 没食子酸对照品(中国药品生物制品检定所)
仪器设备:1 仪器
1.1 高效毛细管电泳仪
未涂层熔硅弹性石英毛细管内径75μm;,柱长60cm,有效柱长45cm。
1.3紫外吸收检测器
2 色谱条件
2.1缓冲盐:20mmol/L硼酸盐
2.2检测波长:271nm
2.3 重力进样(10cm×5S)
2.4运行电压:20KV
试样制备:1. 对照品溶液的制备
精密称取没食子酸对照品19.5mg于25mL量瓶中,用95%乙醇溶解并稀释至刻度,作为对照品溶液。精密吸取没食子酸对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0ml于5ml量瓶中,各加入肉桂酸内标液1ml,95%乙醇溶液定容至刻度。
称取肉桂酸对照品9.6mg,用95%乙醇溶解并稀释至25mL,作为内标溶液。
取六味地黄丸粉碎后,称取粉末5g,加95%乙醇50mL,浸泡12h,100℃加热回流提取2h,过滤,滤渣重复提取2次,合并提取液,减压浓缩至10mL,取该溶液2mL,加入内标溶液1mL,95%乙醇稀释至5mL,作为供试品。
操作步骤:1. 标准曲线的建立
依法进样测定,,以没食子酸对照品峰面积与内标峰面积的比值对其浓度绘制标准曲线,计算线性回归方程。得Y=-0.016X 0.1333,r=0.9993;线性范围为15.6~312mg/L。
取供试品溶液,依法进样测量,记录各组份峰面积值,计算没食子酸的含量。
注:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
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