简单介绍基因工程的基本步骤的内容
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基因工程的基本步骤思维导图模板大纲
①化学合成法,已知某基因的核苷酸序列
难点:搞到基因排列顺序
②基因组DNA文库法
限制性核酸内切酶获取目的基因
③cDNA文库法
找mRNA→cDNA(逆转录酶)
④PCR法
已知目的基因或DNA片段两端序列,合成引物,体外高效扩增
质粒
能自我复制
有选择标志
具有两个以上的遗传标记物,便于重组体的筛选和鉴定
有外源DNA插入位点,常具有多个单一限制性酶切位点
RE+连接酶
转化:最常用,质粒→大肠杆菌、酵母细胞
转染:质粒→真核(不包括酵母细胞)
感染:质粒→病毒
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