氟化KGM实验设计思维导图

使用具有15 kV加速电压的扫描电子显微镜（SEM）型号S 2700

通过临界点干燥（Emitech）干燥样品

安装在铝存根上

使用E-1010型溅射涂布机（Emitech）涂上金

核磁共振实验均记录在400 MHz瓦里安英洛瓦波谱仪上

为了表征壳聚糖及其氟化衍生物（C1至C3），将材料溶解在氘代乙酸（2%氘代乙酸/D2O v/v）的水溶液中，而季铵化Z1则溶解。

Z3衍生物仅溶于D2O。

氟取代通过19F NMR（脉冲瓦里安400 MHz）确认

季铵基团的存在通过1 H NMR确认

壳聚糖衍生物的傅里叶变换红外 （FTIR） 光谱记录在 PerkinElmer Spectrum 100 FT-IR 光谱仪上

伤口模拟液的配置

水胶体敷料,取 8.298 g 氯化钠和 0.368 g 二水氯化钙和1 L去离子水,在超声仪器中混合均匀

测量样品的溶胀速率

每组设置三个平行样品

分别记录每个样品的重量(m1)

样品完全浸入伤口模拟液中并放置于密闭的37℃的鼓风干燥箱中

在24h和48h后分别将样品从溶液中取出,用镊子夹住甩干表面水分并称其重量,并记录样品的重量(mt)

MTT法检测

将不同样品置于无菌离心管中,加入一定体积的无血清培养基,放入摇床中,37 ℃下浸提24 h,获得浸提液

将20 μL的去离子水(对照组)、20 μL的五组不同样品分别加入到含有180 μL稀释后的293T细胞悬浮液 (浓度为 1×105 cells/mL) 的96孔板中,随后在37℃ 恒温二氧化碳培养箱中孵育24 h

去除培养液后,向孔板中加入200 μL 0.5 mg/mL MTT溶液(溶剂:PBS),并在37℃的培养箱中进一步培养4 h

移除MTT后,向孔板中加入200μL DMSO并振荡15 min,待孔板底部的紫色沉淀完全溶解后取出上清液备用

用酶标仪测量上清液在490 nm处的OD值