07常用诊断酶的酶活性测定思维导图

（MD）L-草酰乙酸+NADH+H^+^——L-苹果酸+NAD^+^

连续测定法，监测NADH340nm处吸光度下降速率

（AST可逆）L-门冬氨酸+α-酮戊二酸——L-谷氨酸+

排除方法：双试剂底物启动模式（样品与LD混合）+延长迟滞期，LD仅用于去除内源性丙酮酸干扰

缺陷：内源性丙酮酸、GLDH消耗NADH，使下降值偏大

AST/ALT<1：急性肝炎

AST/ALT>2：肝硬化

AST/ALT>3：肝癌

与AMI有关联，但不常用

同工酶：ASTs（胞浆）/ASTm（线粒体），以线粒体为主

催化反应：（AST可逆）L-门冬氨酸+α-酮戊二酸——L-谷氨酸+L-草酰乙酸

辅基：磷酸吡哆醛（维生素B6）

组织定位：肝脏、心肌

（HK己糖激酶）ATP+GLU（葡萄糖）——ADP+G6P（葡萄糖-6-磷酸）

（G6PD葡萄糖6磷酸脱氢酶）G6P+NADP^+^——G6PDA+NADPH+H^+^

激活物：N-乙酰半胱氨酸、EDTA（Mg^2+^）

（CK）磷酸肌酸+ADP——肌酸+ATP

排除方法：抑制剂——二腺苷-5-磷酸（AP5A ）和5’腺嘌呤核苷酸（AMP）联用

缺陷：AK（腺苷酸激酶）使CK活性假性升高

CK-MB/CK&gt;0.03提示AMI

同工酶：CK-MM、CK-MB、CK-BB

催化反应：（CK）磷酸肌酸+ADP——肌酸+ATP

辅基：Mg^2+^，其他金属离子抑制

组织定位：骨骼肌>心肌>脑

皮-劳法（一步法）

激活性缓冲液：2-氨基-2-甲基-1-丙醇（AMP）缓冲液

骨病：由于甲状腺与骨代谢有关，如

孕妇、儿童ALP升高

ALP降低：

胆道疾病：尤其是

同工酶：骨、肝、胎盘、肠ALP

催化反应：（ALP）PNPP+AMP——PNP+AMP-Pi

组织定位：

一步法

容易受药物、酒精等影响

酒精、药物、避孕药可诱导GGT升高

同工酶：正常人有GGT2、3，重症时GGT1升高，乙醇性肝坏死、结石、胰腺炎时GGT2增加，GGT4与胆红素有关

肝胆疾病GGT升高

同工酶：GGT1234

催化反应：（GGT）GCNA+甘氨酸甘氨酸——5-氨基-2-硝基苯甲酸+L-γ-谷氨酰甘氨酰甘氨酸

组织定位：肾脏最多，但反应肝胆疾病

连续测定法：监测NADH340nm处吸光度上升速率

L-乳酸+NAD^+^——

正向反应37℃时最适pH为9.4

LD4和LD5对冷不稳定，很难兼顾

正向反应

稳定

浓度高

逆向

用量小

不够稳定

溶血性贫血：LD1升高，LD1<LD2，比例无倒置

黄疸：胆汁淤积：LD4>LD5，肝细胞坏死：LD5>LD4

AMI、恶性贫血：LD1升高，LD1>LD2，比例倒置

同工酶：1心红5肝脾3肝，浓度正常顺序：21345

催化反应：（LDH可逆）L-乳酸+NAD^+^——

组织定位：肝、肺

（α-葡萄糖苷酶）G~2~-NP+G~3~-NP+G~4~-NP+H~2~O——NP+葡萄糖

连续监测

EPS+H~2~O——E-G5+E-G4+E-G3+G2-NP+G3-NP+G4-NP

激活剂：Ca^2+^

S-AMY升高：腮腺炎

胰腺炎等可导致AMY升高

同工酶：P-AMY、S-AMY

催化反应：EPS+H~2~O——E-G5+E-G4+E-G3+G2-NP+G3-NP+G4-NP（水解淀粉）

组织定位：唾液、胰腺，小分子，可在尿中出现

硫代胆碱+二硫代硝基苯甲酸——5-巯基-2-硝基苯甲酸

连续监测

丁酰硫代胆碱——丁酸+硫代胆碱

肝实质损害

羊水、ACHE：神经缺陷

有机磷中毒：两种ChE活性均减低，AChE可降至O

同工酶：假性胆碱酯酶（PChE）——又称丁酰胆碱酯酶(BuChE) 或胆碱酯酶Ⅱ

催化反应：丁酰硫代胆碱——丁酸+硫代胆碱

组织定位：肝脏

α-萘酚+固红TR——有色物质

α-萘酚磷酸酯+H~2~O——α-萘酚+磷酸

通过加或不加酒石酸来测定TRAP和总ACP

骨病、肝病、血液病

血清PAP：前列腺疾病

同工酶：前列腺PAP（P-ACP）、非前列腺TRAP

催化反应：α-萘酚磷酸酯+H~2~O——α-萘酚+磷酸

组织定位：细胞溶酶体，前列腺、血小板、破骨细胞

MAO可作用于多种底物，多用苄胺和对苯甲胺-β-偶氮萘酚

急性肝炎MAO可正常，有坏死时可升高

抑郁症、帕金森、痴呆等MAO升高

肝纤维化（肝硬化）程度

同工酶：MAO-A和MAO-B

催化反应：胺类物质转化

组织定位：线粒体膜外，肝、

测底物变化：比浊法、扩散法

测LPS：双抗体夹心免疫分析法、乳胶凝集法

测产物变化：滴定法、比色法、分光光度法、荧光法和pH电极法

血清中有，但尿中没有，而淀粉酶是有的

急性胰腺炎诊断优于淀粉酶

同工酶：无

催化反应：消化脂肪

组织定位：胰腺

（LDH）

连续测定法，监测NADH340nm处吸光度下降速率

（ALT）L-丙氨酸+α-酮戊二酸——L-谷氨酸+

排除方法：双试剂底物启动模式（样品与LD混合）+延长迟滞期

缺陷：内源性丙酮酸、GLDH消耗NADH，使下降值偏大

心、肝、骨骼肌损伤

肝损伤最敏感标志

同工酶：ALTs（胞浆）/ALTm（线粒体），以胞浆为主

催化反应：（ALT）L-丙氨酸+α-酮戊二酸——L-谷氨酸+L-丙酮酸

辅基：磷酸吡哆醛（维生素B6）

组织定位：肝脏