新冠肺炎病毒检测方法思维导图

将病毒RNA制备战成观序效可以识朋和分析的DN文库，然后使用测序仪同时对数以百无计的核酸序列进行检测。检测结果经生物犒信息学软件处理，最终呈现出病毒相关序列信息。

提取病毒基因组RNA通过反转录变成互补DNA (CDNA)，然后再用病原体特异性的引物，以CDNA作为模板扩增病阆体核酸序列，扩增的过程中荧光染料能同步整合在产物上，研究者可以通过荧光信号的强弱，进行实时检测。

CRISPR系统由向导RNA和Cas蛋白组成，gRNA能够指导Cas蛋白识别并切割带有特异序列的RNA或者DNA分子。Cas13a强白在特异性切割靶标RNA时，会继续切割非靶标RNA，利用这一特点，在整个体系中加入带有荧光标记的RNA信号分子，当带有荧光的RNA被切开时就会发出荧光信号。

环介导等温扩增(LAMP)技术的特点是针对靶基因的特定领域设计特异性引物，利用链置换DNA聚合酶在恒温条件下保温几十分钟，即可实现核酸的扩增。

以荧光素标记抗球蛋白抗体，抗体与相应抗原结合后，荧光标记的抗球蛋白抗体与已结合的抗体发生作用，从而推知抗原或抗体的存在。

将免疫层析法与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法，通过荧光素所发的荧光即可在荧光显微镜下对抗原进行细胞定位。

氯金酸在还原剂如白磷、抗坏血酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电形成带负电的疏水胶溶液，故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合。

研究表明，新型冠状病毒入侵人体3~5 d后，其特异性lgM抗体多会呈现阳性，随后特异性IgG抗体开始由阴转阳，且恢复期其滴度较急性期大幅增高。因此，以检测病人lgM抗体和lgG抗体为主的免疫检测方法是核酸检测方法的重要补充。

利用抗原与抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。冠状病毒有四种主要的结构蛋白：S蛋白、M蛋白、E蛋白、N蛋白。针对SARS冠状病毒的质谱分析发现N蛋白是引起SARS患者产生抗体的主要抗原。由于新冠病毒与SARS-CoV的N蛋白具有高度的序列相似性，据此推测，N蛋白也可作为抗原用于新冠病毒的ELISA法检测。对新冠病毒的N蛋白基因进行扩增与克隆，构建N蛋白基因的重组表达质粒，利用大肠杆菌得到大量重组质粒的表达产物N蛋白，纯化后的N蛋白就可以作为抗原进行ELISA检测。

芯片可以同时对包括新冠病毒在内的100多种病毒进行高通量测序，实现精确检测新冠病毒和其他常见呼吸道病原体。该测序芯片具备成本低、数据分析简单的特点，非常适合作为临床精准诊断的辅助检测工具。

快速检测呼吸道多病毒的全新微流控生物芯片，通过采集患者咽拭子、痰液等分泌物样本，1.5 h内便可一次性检测包括新冠病毒在内的19种呼吸道常见病毒。