生物必修三 基因工程的基本操作程序内容包括目的基因的获取,第二步:基因表达载体的构建(核心),第三步:将目的基因导入受体细胞,基因工程的应用等内容归纳总结
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基因工程的基本操作程序思维导图模板大纲
筛选合适的目的基因
.PCR技术扩增目的基因(知道目的基因两端的核苷酸序列)
PCR的含义
是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术
目的
获取大量的目的基因
原理
DNA双链复制
过程
第一步
变性,加热至90℃以上DNA解链为单链;(高温解旋)
第二步
复性,冷却到50℃左右,引物与两条单链DNA结合;
第三步
延伸,加热至72左右℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。
特点
指数(2n)形式扩增
目的
使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用
组成
目的基因+启动子+终止子+标记基因
启动子
是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的上游,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录mRNA。
终止子
也是一段有特殊结构的DNA片段 ,位于基因的下游,使转录停止。
标记基因的作用
鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
转化的概念
是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
常用的转化方法
将目的基因导入植物细胞
采用的方法是 农杆菌转化法,其次还有 显微注射器和 花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞
最常用的方法是 显微注射技术。方法的受体细胞多是受精卵
将目的基因导入微生物细胞
Ca2+ 处理细胞,促进细胞吸收DNA分子,完成转化过程)
在农牧业方面的应用
转基因抗虫植物,转基因抗病植物,转基因除草剂植物,改良植物的的品质,提高动物的生长速率,改善畜产品的品质
在医药卫生领域的应用
乳腺生物反应器等
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