细胞生物学研究方法脑图思维导图
细胞形态的观察分析方法与细胞工程内容讲解
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思维导图大纲
细胞生物学 第二章 细胞生物学研究方法思维导图模板大纲
细胞形态结构的观察方法
光学显微镜
三部分组成
光学放大系统
为两组玻璃透镜:目镜与物镜
照明系统
包括光源和聚光镜，有时另加各种滤光片以控制光的波长范围
镜架及样品调节系统
分辨率
指能区分开两个质点间的最小距离
分辨率 D的高低取决于光源的波长λ，物镜镜口角α(标本在光轴上的一点对物镜镜口的张角)和介质折射率Ν
如果观察生物组织样品，则通常需要对所观察的材料进行固定和包埋(常用的固定剂如甲醛，包埋剂如石蜡等)，再将包埋好的样品切成厚度约 5m的切片，最后进行染色
碱性染料苏木精和酸性染料伊红分别与细胞核和细胞质的某些成分特异性地结合，从而改变透射光线的波长
相差显微镜和微分干涉显微镜
可见光的波长和频率的变化表现为颜色的不同，振幅的变化表现为亮暗的区别，而相位的变化却是人眼不能觉察的
光线通过不同密度的物质时，其滞留程度也不同密度大则光的滞留时间长，密度小则光的滞留时间短，因而，其光程或相位发生了不同程度的改变
微分干涉显微镜更适于研究活细胞
荧光显微镜
荧光显微镜 (fluorescence microscope) 是在光镜水平上，对细胞内特异的蛋白质、核酸、糖类、脂质以及某些离子等组分进行定性定位研究的有力工具
激光扫描共焦显微镜
超高分辨率显微术
全内反射荧光显微术
基于单分子成像技术
4 和STED 显微术
结构照明显微术
电子显微镜
电子显微镜与光学显微镜的基本区别
电子显微镜的有效放大倍数与分辨本领
电子显微镜的基本构造
电子束照明系统
成像系统
真空系统
记录系统
主要电镜制样技术
超薄切片技术
固定是保持样品的真实性的一个最重要的环节
包埋的目的是保证在切片过程中，包埋介质能均匀良好地支撑样品，以便获得连续、完整并有足够强度的超薄切片
超薄切片的制备过程如图所示切片厚度通常是40~50 nm
电镜样品用重金属盐进行染色
负染色技术
冷冻蚀刻技术
电镜三维重构与低温电镜技术
扫描电镜技术
扫描隧道显微镜
细胞及其组分的分析方法
用超离心技术分离细胞组分
密度梯度离心
速度沉降
速度沉降主要是用于分离密度相近而大小不一的细胞组分
等密度沉降
等密度沉隆用于分离不同密度的细胞组分
特异蛋白抗原的定位与定性
免疫荧光技术
免疫荧光技术就是将免疫学方法 (抗原-抗体特异结合) 与荧光标记技术相结合用于研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法
免疫电镜技术
细胞内特异核酸的定位与定性
细胞成分的分析与细胞分选技术
细胞培养与细胞工程
细胞培养
动物细胞培养
原代细胞
传代细胞
植物细胞培养
细胞培养
原生质体培养
细胞工程
细胞及生物大分子的动态变化
荧光漂白恢复技术
酵母双杂交技术
荧光共振能量转移技术
放射自显影技术
模式生物与功能基因组的研究
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