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2017执业药师备考:《药物分析》精华辅导(1)思维导图

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思维导图大纲

2017执业药师备考:《药物分析》精华辅导(1)思维导图模板大纲

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杂质的去除

酶提取液中常含有杂蛋白、多糖、脂类及核酸等杂质,可用下述方法去除:

调PH和加热法:利用蛋白质对酸、碱和热变性方面性质的差异,可去除非活性杂蛋白。如制备脂肪酶时,在pH3、4时以400C温度加热150 min,淀粉酶活力可丧失90%而被除去,而脂肪酶活力仍保持80%以上。

蛋白质表面变性法:蛋白质表面变性后其性质有所不同,借以去除杂蛋白。如制备过氧化氢酶时,加入氯仿和乙醇进行振荡可以将杂蛋白变性而去除。

蛋白质沉淀剂法:利用醋酸铝、利凡诺、单宁酸、离子型表 面活性剂等蛋白质沉淀剂可以去除杂蛋白及粘多糖类杂质。使用时要注意这类试剂常可引起酶变性失活,因此应迅速除去。

选择性变性法:各种蛋白质对变性剂的稳定性不同,可以用选择性变性剂去除杂蛋白。如细胞色素丙对三氯醋酸较稳定,所以在制备时可用2.5%三氯醋酸使其他杂蛋白变性使沉淀除去。

加保护剂热变性法:酶与底物或竞争性抑制剂结合后,其稳定性常显著增加。所以常用它们为保护剂,再用一些剧烈手段破坏杂蛋白,如用D-甲基苯甲酸为D-氨基酸氧化酶的保护剂,经加热除去杂蛋白,使该酶得到很好的提纯。

核酸沉淀剂法:酶液中的核酸类杂质,可以用氯化锰、鱼精蛋白硫酸盐等沉淀剂使其沉淀而除去。必要时,也可用核糖核酶将核酸降解后除去。

苯妥英钠药物分析

方法名称:苯妥英钠鈥敱酵子⒛频牟舛ㄢ�斨亓糠ā� 应用范围:本方法采用重量法测定苯妥英钠中苯妥英钠的含量。 本方法适用于苯妥英钠。

方法原理:供试品加水溶解后,加稀盐酸,用乙醚振摇提取,置105℃恒重的蒸发皿中,低温蒸去乙醚,并在105℃干燥至恒重,精密称定,所得残渣重量与1.087相乘,即苯妥英钠的重量。

试剂:1.稀盐酸 2.乙醚 仪器设备:蒸发皿 试样制备:1.稀盐酸 取盐酸234mL加水稀释至1000mL. 操作步骤:取供试品约0.3g,精密称定,加水50mL溶解后,加稀盐酸10mL,摇匀,用乙醚振摇提取5次,第一次100mL,以后每次各25mL,合并乙醚液,用水洗涤2次,每次5mL,合并洗液,用乙醚10mL振摇提取,合并前后两次得到的乙醚液,置105℃恒重的蒸发皿中,低温蒸去乙醚,并在105℃干燥至恒重,精密称定,所得残渣重量与1.087相乘,即得供试量中含苯妥英钠(C15H11N2NaO2)的重量。

参考文献:中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005年版,二部,p.323.

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