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核酸的理化性质思维导图

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核酸的理化性质详解

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思维导图大纲

核酸的理化性质思维导图模板大纲

一般理化性质

物理性质

核酸为多元酸,具有较强的酸性

DNA为线型高分子,粘度较大

DNA为白色纤维状固体,RNA为白色粉末,微溶于水,不溶于一般有机溶剂

化学性质

核酸可被酸碱或酶水解成各种组分,用层析,电泳等方法分离,其水解程度因条件而异

RNA能在室温下被稀碱水解成核苷酸,而DNA对碱较稳定,常用此性质测定RNA的碱基组成或除去溶液中的RNA杂质

紫外吸收特性

嘌呤和嘧啶都含有共轭双键

中性最大吸收值在260nm附近

以A260=1.0为标准定量核酸

利用A260/A280判断核酸样品程度

核算结构稳定因素

碱基对间的氢键(维持横向稳定)

碱基堆积力(维持纵向稳定)

环境中的正离子

DNA变性

概念:在某些理化因素的作用下,DNA双键间氢键断裂,空间结构遭到破坏,形成单链无视线团状态的过程

因素

加热

PH值

有机溶剂

本质

双键间氢键断裂

变性后特点

出现增色反应

粘度下降

浮力密度升高

生物活性改变或丧失

核酸复性

概念:在适当条件下变性DNA的两条互补链重新缔合成双螺旋的过程

条件

一定的离子强度(削弱两链上磷酸基团的斥力)

较高温度(避免氢键随机形成,必须形成有效的氢键,才能维持其稳定性)

因素

复性的温度Tm=25℃是比较合适的温度

DNA单链片段的浓度

DNA单链片段的长度

DNA单链片段的复杂度

溶液离子的强度:维持一定的离子强度

核酸分子杂交

概念:值亲缘关系相近的不同来源的DNA单链之间,或DNA单链与RNA单链之间通过碱基互补形成杂交分子的过程。

核酸的沉淀

在酚/Cl仿抽取以后,水相中的核酸可在一定盐浓度下,使用2.5~3倍体积的无水乙醇于低温下进行沉淀。

纯化方法

离心法

电泳法

色谱法

应用

研究DNA分子中某一种基因的位置

确定两种核酸分子间的序列相似性

检测某一些专一序列在待测样品中是否存在,使基因芯片的基础

用于疾病诊断

核酸含量测定常用方法

紫外吸收光谱法

定磷法

定糖法

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