分析化学HPLCMS分析实验条件的选择思维导图
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分析化学HPLCMS分析实验条件的选择思维导图模板大纲
选择离子监测是对一个或一组特定离子进行检测的技术
当目标化合物的质谱已知时,在操作前确定欲监测的质量,只对其进行检测而不记录其他离子
只检测一个质量的离子称为单离子监测,检测多离子的选择离子监测称为多离子检测
选择离子监测可以把全扫描模式所得的复杂的总离子色谱图变得非常简单,即获得如上所述的质量色谱图
由于仅检测一个或几个离子,使检测器接受某一离子的时间比全扫描模式下更多,离子流强度大两个数量级
因此提高了灵敏度约100倍,同时也有更快的扫描速度。选择离子监测主要用于定量分析
选择反应监测是串联质谱的一种检测模式,即监测一个或几个特定的离子反应
监测几个离子反应又称为多反应监测,在选择反应监测中要先选定前体离子
再对其进行碰撞诱导裂解,产生产物离子,最后对选定的产物离子进行检测
选择反应监测与SIM一样能对复杂混合物中的痕量组分进行快速鉴别和定量分析
而且由于它监测两组特定且直接相关的离子,故其选择性更高,同时由于对特定离子的扫描次数更多,灵敏度也更高
由选择反应监测获得的谱图也与质量色谱图(或总离子流色谱图)相似
其峰面积或峰高用于目标化合物的定量分析
常用流动相为水、甲醇、乙腈及它们的混合物,需要调节pH时,还可用醋酸、甲酸或它们的铵盐溶液
应避免磷酸盐或离子对试剂等,流量对LC-MS分析有较大影响,要根据柱内径和接口的不同来选择流量
碱性物质如仲胺、叔胺选择正离子检测模式,可用醋酸或甲酸使试样酸化至pKa-2
酸性物质及含有较多强电负性基团的物质,选择负离子检测模式
接口的干燥气体温度应高于待分析物沸点20℃左右
同时要考虑物质的热稳定性和流动相中有机溶剂的比例
分离效能和定性鉴别能力同时增加,并使色谱-质谱在线联用程序一气呵成
这是其他任何一种分析方法所不及的,色谱-质谱联用分析的定性能力强
除保留时间外,尚有分子离子、碎片离子、离子峰强比、同位素离子峰、总离子流色谱峰
选择离子色谱峰及选择离子色谱峰所对应的保留时间窗及质谱图等多种指标
除分子离子及碎片离子外,还获得准分子离子、多电荷离子,这些都是独特的定性鉴别的重要参数
使得色谱-质谱联用的定性方法远比GC、HPLC、CE法更可靠
色谱-质谱联用仪采用的是一种通用的灵敏度较高的检测器,可同时检测多种化合物
选择离子和选择反应监测手段大大提高了方法的灵敏度和选择性
使色谱-质谱联用技术的定量分析准确度高,色谱-质谱联用分析方法适用范围广
GC-MS适合于小分子,易挥发性化合物的分析
LC-MS适合于强极性、挥发性差、易热分解、大分子化合物及离子型化合物的分离鉴定和分析
液相色谱和质谱联用,简单来说,就是把一堆同样名字的人(同样保留时间的物质)单独叫出来(分离出来)
然后依次比对他们本质的基因片段(质荷比),虽说直接对比基因片段(质荷比)有时候也可以出结果
但是先用名字(保留时间)来结合辨别效率会更快,准确度也更高,这也就是为什么要做液相色谱&质谱联用的原因
有机混合物样品用微量注射器由色谱仪进样口注入,经色谱柱分离后进入质谱仪离子原在离子源被电离成离子
离子经质量分析器,检测器之后即成为质谱仪信号并输入计算机
样品由色谱柱不断流入离子源,离子由离子源不断进入分析器并不断得到质谱
只要没定好分析器扫描的质量范围和扫描时间,计算机就可以采集到一个个的质谱
如果没有样品进入离子源,计算机采集到的质谱各离子强度均为0
当有样品过入离子源时,计算机就采集到具有一定离子强度的质谱
并且计算机可以自动将每个质谱的所有离子强度相加
显示出总离子强度,总离子强度随时间变化的曲线就是总离子色谱图
总离子色谱图的形状和普通的色谱图是相一致的,它可以认为是是用质谱作为检测器得到的色谱图
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